我今晚八点钟上高速，凌晨一点多的下高速，这样用收费吗？

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你好，需要收费的
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高速过路费怎么计算：一级高速公路一般收费每公里0.43元，二级公路一般收费0.41元，全国统一平均约四毛多一点。货车正常装载部分小于等于10吨按基本费率每公里每吨0.08元计费。
法律依据：
交通部关于贯彻《收费公路车辆通行费车型分类》第一条
各省、自治区、直辖市交通主管部门应按照JT/T489-2003标准的规定，对本辖区内的收费公路车型分类进行调整和统一，并会同财政、物价等部门按照调整后的车型分类标准重新核定本辖区的收费公路车辆通行费收费标准，并报部备案。